PE URMELE NUCLEOTIDELOR
Wednesday, 2017-12-13, 6:41 AM



Welcome Guest | RSS
[ Main ] [ Blog ] [ Registration ] [ Login ]
Site menu

Tag Board
200

Our poll
Rate my site
Total of answers: 1

Main » 2008 » August » 24 » GENA EWS (Sarcomul EWING)
GENA EWS (Sarcomul EWING)
3:48 PM
Autori: Dumitru Miscalencu; Camelia Iancu; Florica Mailat; Ilinca Nicolae articol preluat de pe www.ebooks.unibuc.ro

Oncoproteina EWS este caracteristica celulelor tumorale ale sarcomului Ewing - o tumora maligna cu structura polimorfa-. În multe cazuri de cancer, rearanjarea cromosomilor specifici tumorali induce aparitia de produse himerice care au abilitatea de a transforma celulele.
Tumorile care apartin familiei Ewing prezinta translocatii recurente constând în fuziunea genei EWS din cromosomul 22q 12 cu diferiti membrii ai factorilor de transcriere FLI-1, ERG, ETV-1, E1AF si FEV. Unii din acesti factori sunt membrii si ai familiei ETS. Transcriptele hibrid cele mai frecvente în celulele tumorale Ewing sunt: EWS/FLI-1. Aceasta gena de fuziune rezultata din translocatia t(11;22) joaca un rol cheie în patogeneza sarcomului Ewing.
Transcripte hibrid s-au detectat si în celulele tumorale gigante dintr-un neoplasm de os, cu caracter intermediar între leziunile benigne si maligne. În 13 din 15 cazuri de asemenea tumori cu celule gigante, prin tehnica PCR “semi-nested” s-au detectat produse himerice dupa doua cicluri de amplificare. Prezenta acestor produse a fost confirmata în 3 din 8 culturi primare din aceste tumori, în care s-a detectat acelasi tip de transcripte hibrid observata si în proba de tumori primare. Secventierea acestor transcripte demonstreaza prezenta componentelor EWS si FLI în produsele himerice.
Aspectele mentionate mai sus ofera un model de studiu pentru mecanismele formarii genelor de fuziune EWS/FLI în tumorile de origine mezenchimala. Gena de fuziune EWS/FLI poate functiona ca un factor de transcriere cu aceeasi specificitate de cuplare la DNA ca si FLI-1. Atât EWS cât si gena de fuziune se pot asocia cu holoenzima polimeraza RNA II, ca si cu SF-1 (factor de procesare esential).
Proteina U1C, una din cele trei proteine mici nucleare U1,- specifice ribonucleoproteinelor interactioneaza cu EWS si EWS/FLI, atât in vitro cât si in vivo. De asemenea, U1C interactioneaza si cu alti factori de procesare, intervenind astfel în stadiile timpurii ale dezvoltarii. Coexpresia EWS/FLI-U1C represeaza transactivarea mediata de gena hibrid sugerând ca aceasta interactiune poate avea semnificatii functionale. De aici concluzia ca U1C ca proteina de procesare poate functiona si în reglarea transcriptionala. Se sugereaza astfel ca, gena EWS si gena hibrid EWS/FLI pot functiona atât în procesele de transcriere cât si în cele posttranscriptionale.
Familia tumorilor sarcomului Ewing include si tumora neuroectodermica periferica, definita genetic prin translocatii cromosomiale specifice care conduc la fuziunea genei EWS cu un membru al familiei genelor de transcriere ETS cum este FLI-1 (90-95%) sau ERG (5-10%). Tipul cel mai comun al transcrierii prin fuziune este tipul 1 EWS/FLI –1 care este asociat cu o prognoza favorabila, deoarece codifica un activator functional mai slab comparativ cu alte tipuri de fuziune. Indexul proliferarii Ki-67 este mai înalt în cazul EWS/ERG decât în cazul EWS/FLI-1.
Translocatia t(11;22) (q24;q12) este un marker molecular specific pentru tumorile familiei sarcomului Ewing. Pe baza acestei translocatii se presupune ca unele neuroblastoame olfactive apartin, de asemenea, acestei familii. Totusi, din 13 asemenea tumori numai una a prezentat gena de fuziune EWS/FLI-1.
Rearanjarea genei EWS cu FLI-1 apare timpuriu în patogeneza tumorilor din familia sarcomului Ewing, deoarece aberatia cromosomiala este patognomica pentru sarcomul Ewing. Proteina adenovirala Ad.5 E1A induce acest rearanjament în numeroase tipuri celulare, ceea ce sugereaza un rol etiologic al agentilor virali în generarea aberatiillor cromosomiale oncogenice, dar în acelasi timp, poate avea un impact semnificativ pentru folosirea vectorilor adenovirali în terapia genica. Pe de alta parte, se arata absenta produselor himerice EWS-FLI-1 din culturi pe termen scurt sau lung de linii stabil trnsformate de adenovirus, ca si din liniile care exprima tranzitoriu E1A. Se demonstreaza si absenta lui E1A din tumorile familiei sarcomului Ewing. De aici, concluzia ca adenovirusul nu intervine în patogeneza acestei tumori si deci, rearanjarea genelor specific tumorale nu este influentata de adenovirus.
O alta translocatie t(12;22) constatata frecvent în sarcomul cu celule clare induce fuzionarea genei pentru proteina sarcomului Ewing cu factorul activator al transcrierii (ATF-1). Experimentele cu anticorpi anti-ATF-1 arata ca proteina de fuziune EWS/ATF-1 are un rol direct în mentinerea viabilitatii celulelor acestui tip de sarcom si, de asemenea, ca anticorpii ar putea fi folositi pentru blocarea proteinei tumorale.
Oncoproteina celulara a sarcomului Ewing (EWS) si ATF sunt markeri înalt specifici pentru melanomul malign al structurilor moi, fiind în acelasi timp un potent activator al câtorva promotori ce induc cAMP, asa cum este promotorul somatostatin. S-a explorat în celulele melanomului potentialul acestui promotor asupra expresiei toxice a genelor. Când în aceste celule se introduce gena de fuziune somatostatin-TK HSV, aceasta le confera o puternica sensibilitate specifica celulei, la ganciclovir –un prodrog citotoxic-. Aceasta sensibilitate presupune prezenta locului ATF-binding în promotorul somatostatin sugerând ca expresia genei toxice este cauzata de hibridul EWS/ATF-1. Astfel se releva potentialul de utilizare a promotorului somatostatin pentru terapia citotoxica a prodrogului în celulele melanomului malign.
Prezenta unor domenii SH3 de interactiune în terminusul NH2 al EWS creste potentialul hibridului EWS/WT-1 (WT-1 este o gena supresoare de tumori). Se constata ca EWS/WT-1 se poate asocia cu domeniul SH3 al câtorva proteine inclusiv v-src. Expresia ectopica a v-src fosforileaza in vivo EWS/WT-1 si amplifica abilitatea de transactivare a domeniului NH2-terminal EWS. Alterarea structurii domeniilor v-src SH2 sau SH3 produce mutante care nu pot interactiona cu EWS/WT-1 si nici nu pot creste capacitatea transcriptionala a EWS.
Se sugereaza posibilitatea ca unele proprietati transcriptionale ale EWS/WT-1 ar putea fi reglate pe o cale de semnalizare citoplasmatica. In vivo EWS/WT-1 este fosforilata la reziduurile serina si tirozina, ceea ce afecteaza cuplarea la DNA. Poate, de asemenea, interactiona cu c-abl prin modificarea unor reziduuri de tirozina. Fosforilarea tirozinei EWS/WT-1 de catre c-abl regleaza negativ capacitatea sa de cuplare la DNA. Prin urmare, activitatea biologica a EWS/WT-1 este intim legata de statutul fosforilarii sale.
Tot mai frecvent se constata ca diferite clase de proteine care cu pleaza la DNA, asa cum sunt ATF-1, WT-1 si CHOP, fuzioneaza cu EWS în diferite fenotipuri tumorale. Astfel, s-a detectat o noua translocatie si anume translocatia t(1;22) ( q35.1;q12) cu gena numita ZSG (Zinc finger Sarcoma Gene) ce codifica proteina Zinc-finger- Cys2-His-2- care contine un domeniu transcriptional represor-like la N-terminus. Rearanjarea implica intronul 8 al EWS si exonul 1 al ZSG creind o secventa lineara ce contine domeniul transactivator al EWS fuzionat cu domeniul Zinc-finger al ZSG. Acestui produs îi lipseste domeniul represor transcriptional la N-terminus al ZSG.
S-a demonstrat experimental actiunea proteinelor de fuziune EWS cu un produs ETS. In vitro, liniile policlonale stabilizate exprima doua diferite gene EWS-ETS; fie EWS/FLI-1, fie EWS/ETV-1, care induc expresia genei citocheratinei 15. Injectate la soarecii SCID-CB-17, ambele gene de fuziune induc si schimbari morfologice, histologice si ultrastructurale în fibroblastele NIH 3T3. Celulele native cu morfologie fusiforma se transforma în celule poligonale cu rata N/P înalta si care exprima abundent citocheratina. Acest model murin creiat în celulele NIH 3T3 derivate din mezenchim releva noi caractere ale diferentierii neuroectodermale si epiteliale. Se apreciaza astfel ca, translocatiile cromosomiale specifice sarcomului Ewing induc fuzionarea genei EWS cu un subset al membrilor familiei factorilor de transcriere ETS, cea mai comuna fiind gena FLI-1 si mai putin frecvent, genele ERG, ETV-1, E1A-F sau FEV. Aceste proteine de fuziune se crede ca actioneaza ca factori de transcriere aberanti ce cupleaza la DNA prin domeniile de cuplare la DNA-ETS.
Recent s-a relatat ca TGF-beta RII, o gena supresoare de tumori, este o tinta a proteinei de fuziune EWS/FLI-1. Analiza efectelor proteinelor fuzionate EWS-ETV-1 si EWS-ERG asupra expresiei genei TGF-beta RII arata ca în celulele NIH 3T3 exista nivele scazute de mRNA si proteina ale acestei gene, ca de altfel si în liniile celulare cu sensibilitate redusa la TGF-beta. Aceste gene de fuziune supreseaza promotorul TGF-beta RII si activitatea indusa de FLI-1, ERG sau ETV-1. Represia transcriptionala a genei TGF-beta RII reprezinta o tinta importanta a oncogenelor EWS/FLI-1, EWS-ERG sau EWS-ETV-1 si deci, fuziunea proteinelor EWS-ETS poate functiona ca forma dominant negativa a factorilor de transcriere ets.
Tumorile Ewing sunt malignitati umane primare ale tesuturilor dure (os) si moi, caracterizate la cel putin 95% din cazuri, prin transcripte specifice de fuziune cu originea în translocatiile cromosomiale recurente. Protocolul clinic pentru tumorile Ewing cu înalt risc de metastazare include chemoterapia si radioterapia cu doze înalte, urmate de reinfuzia cu celule stem din sângele periferic (PBSC).
Views: 880 | Added by: codugenetic
Total comments: 0
Only registered users can add comments.
[ Registration | Login ]
Login form

Calendar
«  August 2008  »
SuMoTuWeThFrSa
     12
3456789
10111213141516
17181920212223
24252627282930
31

Search

Site friends
Curs Valutar BNR



       top65.ro            
         


Statistics

TOTAL CONECTATI/ TOTAL ONLINE: 1
VIZITATORI/GUESTS: 1
MEMBRI/USERI 0

Copyright MyCorp © 2017